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病毒RNA m6A甲基化定量检测、酶活性阐发、抗体研讨

宣布者:艾美捷科技宣布时候:2021-02-04

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      上周咱们向大师先容了病毒RNA用于m6A甲基化研讨的样本的提取和纯化方式,这周将为大师带来m6A甲基化研讨相干的产物。

 

      病毒RNA m6A甲基化研讨流程

 

      上周给大师说了病毒RNA的提取和纯化,若是大师的样本是细胞或构造,就参考流程图的右侧局部。对于构造和细胞的m6A甲基化研讨大师应当都很清晰,那末病毒RNA m6A研讨有甚么差别呢?

 

病毒RNA m6A甲基化研讨流程

 

      下面这个流程算是总结版本的。通俗咱们研讨m6A逃不过三大方面:m6A RNA的定量; m6A 甲基转移酶和去甲基化酶活性阐发;m6A RNA富集、RNA特同性甲基化阐发和文库成立。

 

      1.病毒RNA m6A定量检测:

       RNA甲基化是一种可逆的翻译后润色,对多量的生物进程发生表观遗传学影响,这些都能够发生在病毒和非病毒衍生的RNA中。此中最罕见的是m6A甲基化,占一切RNA甲基化的80%以上,其次是5-mC甲基化,它能够发生在各类RNA份子中。若是您的研讨筹算研讨RNA中m6A或5-mC的环球甲基化程度,咱们保举的比色法和荧光法试剂盒能够赞助供给疾速、精确的整体程度定量。可是,也必须晓得,若是利用病毒肇端资料,这个进程会略有变更。若是是这类环境,您须要确保能够进步所发生的总RNA的产量,由于从病毒肇端资料搜集的低量常常太低,没法用于下流。 咱们倡议参考咱们比来的通知布告文章的各类方式的病毒纯化的设法(有须要的小火伴可接洽小艾哟),若何确保总RNA的品质,在您的测验考试流程的前期利用。

 

货号 产物称号 产物描写
cat# P-9005 EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit (Colorimetric) 在3h 45min内对RNA中的N6-甲基腺苷(m6A或6mA)停止比色定量。
cat# P-9008 EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit (Fluorometric) 在3h 45min分钟内荧光定量RNA中的N6-甲基腺苷(m6A或6mA)
cat# P-9015 MethylFlash Urine N6-methyladenosine (m6A) Quantification Kit (Colorimetric) 利用按捺性协作性ELISA在4小时内对尿液中的m6A停止比色定量。


     2.m6A 甲基转移酶和去甲基化酶活性阐发

      若是您打算研讨RNA甲基化酶或去甲基化酶的活性/按捺,咱们倡议利用咱们壮大的核提取试剂盒,它速率快,确保分手后酶活性坚持稳定。一旦搜集到核提取液,就能够进入有助于丈量甲基化酶或去甲基化酶活性/按捺的检测。咱们的比色ELISA试剂盒许可对提取的核样品停止高通量或手动通量阐发,并停止了优化,以确保背景旌旗灯号坚持在较低程度,是以丈量是精确和靠得住的。

 

货号 产物称号 产物描写
cat# P-9013 Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit (Colorimetric) 基于ELISA的5小时内FTO、ALKBH5等活性/按捺的定量阐发。
cat# P-9019 Epigenase m6A Methylase Activity/Inhibition Assay Kit (Colorimetric) 基于酶联免疫吸附法的METTL3、METTL14等在5小时内对多种物种的活性/按捺性停止定量。

 

      3.m6A RNA富集和文库成立

      一旦任务流程中的其余步骤实现,一项研讨能够终究会追求富集基因组中存在m6A的局部,并经由过程构建文库为下一代测序筹办这些片断。咱们下面列出的检测试剂盒都许可富集m6A RNA,而EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq试剂盒为同时构建文库供给了额定的功效。

 

货号 产物称号 产物描写
cat# P-9018 EpiQuik CUT&RUN m6A RNA Enrichment Kit 基于CUT&RUN的MeRIP,增添特同性和旌旗灯号。
cat# P-9016 EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq Kit 基于CUT&RUN的一体化MeRIP和NGS文库制备。

 

      4.m6A RNA抗体

      如前所述,m6A是最丰硕的mRNA润色,是以,凡是是研讨表观遗传RNA润色的研讨职员感乐趣的主题。此类研讨凡是包罗单克隆抗体和多克隆抗体,以考证成果并赞助领会一旦宿主传染后这类特定润色若何影响病毒的成长和疾病的影响。 咱们的抗体已在一切列出的利用中获得考证,并为但愿在多量量采办之前测验考试测验考试设法的测验考试室供给尝试范围。

 

货号 产物称号 产物描写
cat# A-1801 N6-methyladenosine (m6A) Polyclonal Antibody 颠末考证的利用。DB、ELISA、ICC、IP、MeRIP、核苷酸阵列。
cat#A-1802 N6-methyladenosine (m6A) Monoclonal Antibody [2H6]

颠末考证的利用。DB, ELISA, IF, IP, MeRIP, 核苷酸阵列。

 

      看到下面这两种抗体的利用良多,根基涵盖咱们测验考试能够利用到的测验考试范例,可是呢有个很是罕见的利用却不,没错,便是WB。良多小火伴问咱们的这个抗体能够做WB不?每次都很遗憾的说不能够。可是,此刻咱们有了能够做WB的m6A抗体!!!为了填补小火伴们的遗憾,咱们比来签约代办署理了一个新的品牌——Synaptic Systems(SySy),SySy是德国闻名的品牌,专一于研发和出产针对突触和神经迷信相干抗体,和用于细胞生物学、构造病理学和高分辩率显微镜的各类抗体,他们的抗体被诸多高分文章援用,产物怪异且专业。他们的家的m6A抗体信息以下:

 

货号 产物称号 产物利用/合用物种 品牌
cat# 202-003 m6A - 202 003 WB / IP / ICC / IHC-P / ELISA
人 / 大鼠 / 小鼠 / 真核生物 / 原核生物
Synaptic Systems
cat#202-011 m6A - 202 011 WB
人 / 大鼠 / 小鼠 / 真核生物 / 原核生物
Synaptic Systems
cat# 202-111 m6A - 202 111 WB / IP / ELISA
人 / 大鼠 / 小鼠 / 真核生物 / 原核生物
Synaptic Systems
这三个产物的参考文献也很是多哟,列位小火伴想要领会的可征询小艾哟!

 

      最初的最初,总结一下病毒RNA m6A研讨流程与通俗的构造和细胞样本的区分:实在没啥区分,用的试剂盒根基都一样,方式也是一样的,可是区分在哪呢?便是病毒RNA的量和纯度题目,这个会影响全部测验考试流程,以是为了更好地实现测验考试课题,列位小火伴要制备好的病毒RNA样本哦!

 

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